6.1.1. Методы изучения
функций желез внутренней секреции
Наиболее давним и широко используемым приемом вплоть до
настоящего времени является удаление или разрушение органа, который, по
предположению, выполняет эндокринную функцию, и прослеживание последствий такой
операции. Устанавливают симптомы недостаточности гормонов и затем путем
введения экстрактов железы или ее ткани, т. е. путем так называемой заместительной
терапии, демонстрируют восстановление нормальных функций. Таким образом
доказывается выработка в органе гормона с определенным физиологическим
действием. В последние десятилетия расшифрована химическая структура и
осуществлен синтез многих гормонов. Очищенные препараты гормона часто
используют в качестве заместительной терапии при определении функции изучаемого
органа. Экстракты или гормоны исследуют также при введении интактным животным,
что позволяет получить дополнительную информацию о функциональном значении этих
гормонов. Введение экстрактов эндокринных желез, очищенных препаратов или синтетических
гормонов широко используют в клинической медицине прежде всего в случаях
нарушения нормальной функции желез. Если функция эндокринной железы
недостаточна, гормон можно вводить извне; в тех случаях, когда функция железы
не нормализуется, эту заместительную терапию проводят в течение всей жизни
больного. В качестве примера можно привести некоторые формы сахарного диабета,
возникающего в результате нарушения функции β—клеток поджелудочной железы;
при этом больному вводят гормон поджелудочной железы — инсулин — с
постоянным контролем уровня глюкозы.
Кроме удаления эндокринных желез и выполнения
заместительной терапии в эндокринологии используют гистофизиологический
метод оценки функционального состояния эндокринных органов. При этом
изучают изменения в железе на разных этапах жизненного цикла животного или при
различных физиологических нагрузках с привлечением специфических
гистологических и гистохимических методов, электронной микроскопии, с
количественной оценкой показателей функций клеток и тканей.
Большое значение имеет определение содержания
гормона в ткани железы и в крови. Для этой цели ранее широко использовали метод
биотестирования, состоящий в том, что испытываемый экстракт вводят животному
(после удаления у него соответствующей эндокринной железы) и прослеживают
возникающие изменения изучаемого биологического эффекта гормона. Количество
гормона, которое изменяет такой показатель на определенную величину, называют гормональной
единицей. Этот метод требует больших количеств испытываемого материала,
сложен и недостаточно точен. Однако для некоторых гормонов (например, для
инсулина) гормональные единицы до сих пор используют в качестве количественной
меры концентрации. В настоящее время для определения гормонов широко используют
радиоиммунологический метод. В радиоиммунологическом анализе используют иммуноглобулины
(антитела), которые специфически связывают исследуемый гормон. Связывание
гормона антителами высокоспецифично, что позволяет анализировать малые
количества гормонов.
Радиоиммунологический анализ весьма точен и
чувствителен, причем в течение одного рабочего дня можно обработать несколько
сотен проб. Однако с его помощью можно измерять только иммунологическую
активность гормона, которая не всегда совпадает с биологической активностью.
В дальнейшем был разработан метод, в котором для
связывания гормона используют специфические рецепторы. Это дает
возможность получать более точные данные о концентрации гормона.